Шановні колеги! Науковий семінар Інституту біохімії ім. О.В.Палладіна НАН України «Актуальні проблеми сучасної біохімії» продовжує свою роботу. 12 червня (вівторок) 2012 р. о 10-30 в Актовій залі Інституту будемо слухати доповідь аспірантки КНУ імені Тараса Шевченка Липової Надії Миколаївни “Унікальні альтернативні сплайс-варіанти 6-фосфофрукто-2-кінази/фруктозо-2,6-бісфосфатази-1 та -2 у клітинах людини та тварин”. Авторські тези доповіді додаються. Ми будемо раді зустрітися з Вами та Вашими колегами на засіданні нашого семінару. З повагою – С.О.Костерін.
Тема доповіді: “Унікальні альтернативні сплайс-варіанти 6-фосфофрукто-2-кінази/фруктозо-2,6-бісфосфатази-1 та -2
у клітинах людини та тварин”
Липова Надія Миколаївна, аспірантка КНУ імені Тараса Шевченка
Робота виконана у відділі молекулярної біології Інституту біохімії
ім. О.В. Палладіна НАН України
6-фосфофрукто-2-кінази/фруктозо-2,6-бісфосфатази є важливими регуляторами метаболізму глюкози і процесів проліферації, оскільки вони не лише контролюють активність PFK1, а і активують фосфорилювання глюкози та процеси транскрипції ростових факторів. Відомо багато ізоформ PFKFB, але альтернативні сплайс-варіанти мРНК PFKFB2 були вивчені недостатньо. У зв’язку з цим, метою роботи було виявлення нових альтернативних сплайс-варіантів мРНК PFKFB1 та PFKFB2 у щурів, мишей та людини, а також вивчення їх експресії за умов цукрового діабету та у клітинах гліоми за умов гіпоксії та ішемії.
У результаті проведених досліджень виявлено нові унікальні за своєю структурою альтернативні сплайс-варіанти PFKFB1 та PFKFB2 у тканинах щурів, мишей та клітинах гліоми людини, що мають делеції чи інсерції як у каталітичних доменах, так і у регуляторних ділянках фосфофруктокіназної та фруктозобісфосфатазної частин ензиму. Більшість виявлених альтернативних сплайс-варіантів мРНК PFKFB2 різняться між собою за структурою вставок чи делецій у різних організмів, але функціонально вони подібні, оскільки в результаті альтернативного сплайсингу елімінуються ділянки, відповідальні за прояв кіназної або/і бісфосфатазної активності. Також показано, що експресія мРНК PFKFB2 та її альтернативних сплайс-варіантів порушується в легенях і нирках за умов експериментального цукрового діабету в сторону пригнічення гліколізу, причому значною мірою за рахунок альтернативного сплайсингу.
Встановлено, що рівень експресії мРНК PFKFB1 та PFKFB2, а також їх альтернативних сплайс-варіантів, змінюється за умов гіпоксії і дефіциту глютаміну або глюкози, що імітують деякі ефекти ішемії, причому ці зміни здебільшого залежить від функції ERN1-сигнального шляху стресу ендоплазматичного ретикулуму, який контролює їх експресію. Показано, що для мРНК PFKFB2 характерні добові зміни у рівні експресії у різних органах щурів.
Отримані нами дані розкривають можливі молекулярні механізми різнорівневої регуляції метаболізму глюкози через зміни експресії основних форм PFKFB та її альтернативних сплайс-варіантів.