УДК 517.121
М. САВЧУК
МЕТОД ВИЗНАЧЕННЯ КОНЦЕНТРАЦІЇ ФОРМАЛЬДЕГІДУ В ОРГАНІЗМІ ТВАРИН ТА ДЕЯКІ ЙОГО ЕКЗОГЕННІ ДЖЕРЕЛА
Інститут біохімії імені О.В.Палладіна, НАН України, Київ; mnsavchuk@gmail.com
В організмі людини формальдегід (ФА) утворюється ендогенно в процесі метаболізму амінокислот і ксенобіотиків та може надходити з екзогенних джерел. Формальдегід проявляє мутагенну, геннотоксичну, імуногенну та канцерогенну дії, є одним із чинників розвитку злоякісних новоутворень дихальної системи та лейкемії у людини, здатний утворювати інтрамолекулярні зшивки в білках і нуклеїнових кислотах та міжмолекулярні зв’язки між цими сполуками.
Нами розроблено новий метод визначення концентрації формальдегіду (ФА) в організмі тварин, що наближений до умов in vivo. Процедура методу наступна: за 40 хвилин до забою тваринам вводиться перитоніально 1% розчин дімедону на фізрозчині, гомогенат тканини печінки готується на 5% розчині аміаку (1:5), білки осаджуються Ва(ОН)2 та ZnSO4. До 1 мл надосадової рідини додається 1 мл 20% оцтовокислого амонію (рН 5,5), зразки нагріваються на водяній бані (100°С) 20 хвилин, після чого швидко охолоджуються. Утворений флуоресцентний продукт визначається при lex 380 нм та lеm 460 нм. Метод апробовано на щурах: 1) при пероральному введенні 0,1% розчину ФА в дозі 10 мл/кг через 40 хв концентрація ФА в тканині печінки становила: контроль –(136+24) нмоль/г, дослід – (254+42) нмоль/г (р<0,05); 2) при пероральному введенні розчину семікарбозиду – інгібітору SSAO, основного ферменту синтезу ФА, в дозі 200 мг/кг на дві години: контроль – (139+24) нмоль/г, дослід – (78+13) нмоль/г (р<0,05). Отримані результати доводять, що розроблений метод дозволяє отримати результат, який є адекватним впливам на обмін ФА в організмі.
На основі розробленого методу, були досліджені деякі можливі екзогенні джерела ФА: 1) тіопролін – амінокислота, що є продуктом взаємодії ФА та цистеїну; при пероральному введенні в дозі 446 мг/кг на годину, контроль – (125±23) нмоль/г, дослід – (183±39) нмоль/г (р<0,05); 2) форміат натрію – кінцевий продукт метаболізму формальдегіду, при перитоніальному введенні в дозі 533 мг/кг на 40хв: контроль – (131±23) нмоль/г, дослід – (135±30) нмоль/г; 3) метиламін – субстрат SSAO, при пероральному введенні розчину метиламіну в дозі 250 мг/кг на 40хв, контроль – (128+21) нмоль/г, дослід – (164+28) нмоль/г (р<0,05).
Таким чином доведено, що тіопролін та метиламін є екзогенними джерелами формальдегіду в організмі; можливість утворення ФА з форміату не підтвердилася.