Шановні колеги, вітаю Вас! Науковий семінар «Актуальні проблеми сучасної біохімії» Інституту біохімії ім. О.В.Палладіна НАН України продовжує свою діяльність. 15-го лютого (вівторок) 2022 р. о 10-30 в Актовій залі Інституту будемо слухати доповідь н.с. відділу хімії та біохімії ферментів нашого Інституту к.б.н. Яценко Тетяни Андріївни «Способи визначення tPA і РАІ-1: розробка, апробація і перспективи використання». Традиційно до листа додаємо авторські тези доповіді.
Запрошую Вас та Ваших колег до участі у роботі нашого семінару.
В А Ж Л И В О ! ЯК ЗАВЖДИ, УЧАСТЬ У РОБОТІ СЕМІНАРУ БЕЗПОСЕРЕДНЬО В ЗАЛІ МОЖЛИВА ВИКЛЮЧНО ЗА УМОВ ВИКОРИСТАННЯ МАСКОВОГО РЕЖИМУ ТА ДИСТАНЦІЙНОГО РОЗТАШУВАННЯ ПРИСУТНІХ У ПРИМІЩЕННІ. ДЯКУЮ ЗА РОЗУМІННЯ !
Співробітники відділів також будуть мати можливість приймати участь у роботі семінару ДИСТАНЦІЙНО в системі ZOOM, логін і пароль будуть надіслані додатково.
З повагою – С.О.Костерін.
Способи визначення tPA і РАІ-1: розробка, апробація і перспективи використання
Доповідач: н.с. відділу хімії та біохімії ферментів, к.б.н. Яценко Т.А.
e-mail:
Актуальність. Гемостатичний баланс є запорукою своєчасного запобігання крововтраті та відновлення нормального кровообігу. Компоненти плазміноген/плазмінової системи здійснюють та регулюють фібриноліз, а також залучені до регулювання ряду процесів, таких як запалення, ангіогенез, відновлення та ремоделювання тканин. Широкий спектр захворювань (серцево-судинні, метаболічні, онкологічні захворювання, запальні процеси, тощо) пов’язаний зі зміною гемостатичного балансу опосередковано через зміну продукції активаторів та інгібіторів фібринолізу, тому тканинний активатор плазміногену та інгібітор активаторів плазміногену 1 типу РАІ-1 представляють інтерес як прогностичні маркери.
Методологія дослідження. Обмежений протеоліз, хроматографічні методи очистки протеїнів, визначення активності ензимів та інгібіторів ензимів за хромогенними субстратами, вестерн-блот аналіз.
Результати. Встановлено, що відкриття центрів в D-доменах фібрин(оген)у для взаємодії з плазміногеном та тканинним активатором залежить від кальцій-опосередкованих структурних змін в β- і γ-субдоменах. Цей факт використано в розробці способу визначення тканинного активатора плазміногену в біологічних зразках, в якому DD-фрагмент фібрину в присутності хелатора кальцію EDTA виступає як стабільний ефективний стимулятор реакції активації плазміногену тканинним активатором досліджуваного зразку. В розробці способу визначення активності РАІ-1 використано D-фрагмент, одержаний шляхом гідролізу фібриногену бика плазміном в присутності EDTA, внаслідок чого фрагмент набуває максимальної здатності стимулювати утворення плазміну під дією тканинного активатора. Ідея способу полягає в непрямому визначенні залишкової активності екзогенного тканинного активатора після інгібування інгібітором досліджуваного зразка. Обидва способи є швидкими у виконанні, простими і не потребують використання токсичних речовин. Апробація способу визначення активності тканинного активатора проведена на зразках еуглобулінової фракції плазми крові умовно-здорових донорів, вагітних жінок з ускладненою вагітністю, пацієнтів з політравмою і на зразках кондиціонованого середовища фібробластів. Апробація способу визначення активності РАІ-1 проведена на зразках сироватки і плазми крові умовно-здорових донорів, а також на вибірках пацієнтів з хронічною серцевою недостатністю і гіперплазією передміхурової залози, пост-ковідним синдромом та вагітних жінок з ускладненою вагітністю. Показано діагностичний і прогностичний потенціал розроблених способів аналізу та можливість їх застосування в дослідницьких лабораторіях.
Висновки. Розроблені нами способи визначення тканинного активатора плазміногену та РАІ-1 можуть бути застосовані як в дослідницьких цілях, так і в лабораторно-клінічній практиці, оскільки нами показано їх прогностичну цінність для моніторингу стану фібринолітичної системи при ряді захворювань.